色譜分離法包括哪些具體的方法并簡(jiǎn)述其原理(分離純化常用的色譜分離方法)

1.分離純化常用的色譜分離方法有哪些

1、色譜方法根據(jù)分離機(jī)制的不同可分為吸附色譜、分配色譜、離子交換色譜、凝膠過(guò)濾（分子篩）色譜和親和色譜等。

2、（1）吸附色譜法是指混合物隨流動(dòng)相通過(guò)吸附劑時(shí)，由于該吸附劑對(duì)不同物質(zhì)有不同的吸附力而使混合物分離的方法。（2）分配色譜系法是利用固定相與流動(dòng)相之間對(duì)待分離組分溶解度的差異來(lái)實(shí)現(xiàn)分離。

（3）離子交換色譜法是利用離子交換原理和液相色譜技術(shù)的結(jié)合來(lái)測(cè)定溶液中陽(yáng)離子和陰離子的一種分離分析方法。凡在溶液中能夠電離的物質(zhì)通常都可以用離子交換色譜法進(jìn)行分離。

（4）凝膠色譜法又叫凝膠色譜技術(shù)，是六十年代初發(fā)展起來(lái)的一種快速而又簡(jiǎn)單的分離分析技術(shù)，由于設(shè)備簡(jiǎn)單、操作方便，不需要有機(jī)溶劑，對(duì)高分子物質(zhì)有很高的分離效果。（5）親和色譜法是將相互間具有高度特異親和性的二種物質(zhì)之一作為固定相，利用與固定相不同程度的親和性，使成分與雜質(zhì)分離的色譜法。

2.色譜法有哪些類型

柱色譜法，又稱層析法。是一種以分配平衡為機(jī)理的分配方法。柱色譜主要分為吸附柱色譜、分配柱色譜兩種。

1. 吸附柱色譜原理

在一定條件下，硅膠與被分離物質(zhì)之間產(chǎn)生作用，這種作用主要是物理和化學(xué)作用兩種.物理作用來(lái)自于硅膠表表面與溶質(zhì)分子之間的范德華力.化學(xué)作用主要是硅膠表面的硅羥基與待分離物質(zhì)之間的氫鍵作用。色譜管為內(nèi)徑均勻、下端縮口的硬質(zhì)玻璃管，下端用棉花或玻璃纖維塞住，管內(nèi)裝入吸附劑。吸附劑的顆粒應(yīng)盡可能保持大小均勻，以保證良好的分離效果。除另有規(guī)定外，通常多采用直徑為0.07~0.15mm的顆粒。色譜柱的大小，吸附劑的品種和用量，以及洗脫時(shí)的流速，均按各品種項(xiàng)下的規(guī)定。

在吸附柱色譜中，吸附劑是固定相，洗脫劑是流動(dòng)相，相當(dāng)于薄層色譜中的展開劑。吸附劑的基本原理與吸附薄層色譜相同，也是基于各組分與吸附劑間存在的吸附強(qiáng)弱差異，通過(guò)使之在柱色譜上反復(fù)進(jìn)行吸附、解吸、再吸附、再解吸的過(guò)程而完成的。所不同的是，在進(jìn)行柱色譜的過(guò)程中，混合樣品一般是加在色譜柱的頂端，流動(dòng)相從色譜柱頂端流經(jīng)色譜柱，并不斷地從柱中流出。由于混合樣中的各組分與吸附劑的吸附作用強(qiáng)弱不同，因此各組分隨流動(dòng)相在柱中的移動(dòng)速度也不同，最終導(dǎo)致各組分按順序從色譜柱中流出。如果分步接收流出的洗脫液，便可達(dá)到混合物分離的目的。一般與吸附劑作用較弱的成分先流出，與吸附作用較強(qiáng)的成分后流出。

2. 分配柱色譜原理

方法和吸附柱色譜基本一致。裝柱前，先將載體和固定液混合，然后分次移入色譜柱中并用帶有平面的玻棒壓緊；供試品可溶于固定液，混以少量載體，加在預(yù)制好的色譜柱上端。洗脫劑需先加固定液混合使之飽和，以避免洗脫過(guò)程中兩相分配的改變。

3.常見的色譜分離方法有哪些

常見的色譜分離方法有哪些

液相色譜按分離機(jī)理分為吸附、分配、交換、排阻以及親和五種類型.

利用組分在吸附劑（固定相）上的吸附能力強(qiáng)弱不同而得以分離的方法，稱為吸附色譜法.固定相是固體，目前這種分離模式在液相色譜中用途很小.

利用組分在固定液或者鍵合固定相（固定相）中溶解度不同而達(dá)到分離的方法稱為分配色譜法.固定相是涂覆的固定液或者鍵合的固定相，是目前主流的分離模式，涵蓋了目前液相色譜應(yīng)用范圍的大部.

利用組分在離子交換劑（固定相）上的親和力大小不同而達(dá)到分離的方法，稱為離子交換色譜法.該分離模式主要用來(lái)分離離子型化合物，正是由于如此，現(xiàn)在離子色譜已經(jīng)從液相色譜中分離出來(lái)，稱為離子色譜.

利用大小不同的分子在多孔固定相中的選擇滲透而達(dá)到分離的方法，稱為凝膠色譜法或尺寸排阻色譜法.這個(gè)主要用來(lái)分離高分子子化合物，比如蛋白、比如聚合物.

利用不同組分與固定相（固定化分子）的高專屬性親和力進(jìn)行分離的稱為親和色譜法，常用于蛋白質(zhì)分離.

4.什么是色譜分析法

色譜分析法 chromatography 基于 混合 物 各組 分在體系中 兩相 的物 理化學(xué)性能差異（如吸附、分配差異等）而進(jìn)行分離和分析的方法。

國(guó)際公認(rèn)俄國(guó)M.C.茨維特為色譜法的創(chuàng)始人。 色譜法體系中的兩相作相對(duì)運(yùn)動(dòng)時(shí)，通常其中一個(gè)相是固定不動(dòng)的 ，稱為固定相 ；另一相是移動(dòng)的 ， 稱為流動(dòng)相。

在色譜分析過(guò)程中，物質(zhì)的遷移速度取決于它們與固定相和流動(dòng)相的相對(duì)作用力。溶質(zhì)和兩相的吸引力是分子間的作用力，包括色散力、誘導(dǎo)效應(yīng)、場(chǎng)間效應(yīng)、氫鍵力和路易斯酸堿相互作用。

對(duì)于離子，還有離子間的靜電吸引力。被較強(qiáng)吸引在固定相上的溶質(zhì)相對(duì)滯后于較強(qiáng)地吸引在流動(dòng)相中的溶質(zhì)，隨著移動(dòng)的反復(fù)進(jìn)行與多次分配，使混合物中的各組分得到分離。

色譜分析法的分類比較復(fù)雜。根據(jù)流動(dòng)相和固定相的不同，色譜法分為氣相色譜法和液相色譜法。

①氣相色譜法的流動(dòng)相是氣體 ，又可分為 ： 氣固色譜法 ，其流動(dòng)相是氣體，固定相為固體；氣液色譜法，其流動(dòng)相是氣體，固定相是涂在惰性固體上的液體。②液相色譜法的流動(dòng)相是液體，又可分為？液固色譜法，其流動(dòng)相是液體，固定相是固體；②液液色譜法，其流動(dòng)相和固定相均是液體。

按吸附劑及其使用形式可分為柱色譜、紙色譜和薄層色譜。按吸附力可分為吸附色譜、離子交換色譜、分配色譜和凝膠滲透色譜。

按色譜操作終止的方法可分為展開色譜和洗脫色譜。按進(jìn)樣方法可分為區(qū)帶色譜、迎頭色譜和頂替色譜。

經(jīng)色譜分離出的各組分，與已知標(biāo)準(zhǔn)樣品對(duì)照進(jìn)行定性分析?，F(xiàn)代化的色譜-質(zhì)譜聯(lián)用或色譜-光譜聯(lián)用儀器，配備有豐富的譜圖庫(kù)和微處理機(jī)。

色譜柱流出的組分直接送入質(zhì)譜和光譜儀進(jìn)行定性鑒定和數(shù)據(jù)的定量處理。開發(fā)智能化色譜分析是發(fā)展的主要方向。

色譜法的特點(diǎn)是？①分離效率高。可分離性質(zhì)十分相近的物質(zhì)，可將含有上百種組分的復(fù)雜混合物進(jìn)行分離。

②分離速度快。幾分鐘到幾十分鐘就能完成一次復(fù)雜物質(zhì)的分離操作。

③靈敏度高。能檢測(cè)含量在10-12克以下的物質(zhì)。

④可進(jìn)行大規(guī)模的純物質(zhì)制備。 色譜法在化工、石油、生物化學(xué)、醫(yī)藥衛(wèi)生、環(huán)境保護(hù)、食品檢驗(yàn)、法醫(yī)檢驗(yàn)、農(nóng)業(yè)等各個(gè)領(lǐng)域都有廣泛的應(yīng)用。

在各種色譜法中，以氣液色譜法和液固色譜法應(yīng)用最廣。氣相色譜法分離中、小分子化合物比較理想。

中等大小的分子可用液液色譜和液固色譜分離。離子交換色譜一般用于有離子基團(tuán)的物質(zhì)。

分子尺寸再大時(shí)，用凝膠滲透色譜分離。薄層色譜和紙色譜法的分析速度快、方便、成本低，柱色譜比薄層色譜和紙色譜具有更高的分辨能力。

5.色譜分離的原理

在色譜法中存在兩相，一相是固定不動(dòng)的，我們把它叫做固定相；另一相則不斷流過(guò)固定相，我們把它叫做流動(dòng)相.

譜法的分離原理就是利用待分離的各種物質(zhì)在兩相中的分配系數(shù)、吸附能力等親和能力的不同來(lái)進(jìn)行分離的.

含有樣品的流動(dòng)相（氣體、液體）通過(guò)一固定于柱子或平板上、與流動(dòng)相互不相溶的固定相表面；當(dāng)流動(dòng)相中攜帶的混合物流經(jīng)固定相時(shí)，混合物中的各組分與固定相發(fā)生相互作用，由于混合物中各組分在性質(zhì)和結(jié)構(gòu)上的差異，與固定相之間產(chǎn)生的作用力的大小、強(qiáng)弱不同，隨著流動(dòng)相的移動(dòng)，混合物在兩相間經(jīng)過(guò)反復(fù)多次的分配平衡，使得各組分被固定相保留的時(shí)間不同，從而按一定次序由固定相中先后流出。與適當(dāng)?shù)闹髾z測(cè)方法結(jié)合，實(shí)現(xiàn)混合物中各組分的分離與檢測(cè)。

6.色譜法分離是根據(jù)什么原理進(jìn)行的

色譜分離法；chromatographic separation

在工業(yè)上應(yīng)用色譜分析原理分離性質(zhì)近似組分的方法。使溶液分批通過(guò)垂直的填充吸附劑固定床，將各種組分分離精制。色譜柱內(nèi)的填充吸附劑是多孔的惰性固體，用非揮發(fā)性的惰性液體涂漬。被分離溶液的溶質(zhì)與惰性液體有大小不同的溶解度。如果被吸附的物質(zhì)是氣體，發(fā)生“吸收”現(xiàn)象。如果被吸附的物質(zhì)是液體，發(fā)生“萃取”現(xiàn)象。分離系數(shù)取數(shù)聚決于分配系數(shù)的大小。常用的操作法有：（1）迎頭分離法，當(dāng)溶液連續(xù)通入吸附固定床時(shí)，溶液中諸組分因吸附能力大小不同，可順序地由固定床另一端排出；（2）沖洗分離法，在送入溶液的同時(shí)，通入不被吸附的載體，可順序地被吸附和解吸，然后以一定的間隔隔離開；（3）頂替分離法，在載氣中加入吸附能力最強(qiáng)的組分，使依次頂替被吸附的諸組分。色譜分離除已在分析技術(shù)中廣泛應(yīng)用外，也已在化工、冶金和環(huán)保等領(lǐng)域中加以利用。

色譜的分離原理都是利用待測(cè)物質(zhì)在流動(dòng)相和固定相兩相間的分配系數(shù)的不同而實(shí)現(xiàn)分離.

對(duì)于氣液色譜來(lái)說(shuō)，分離原理是利用不同物質(zhì)在流動(dòng)相以及固定液中的分配系數(shù)（溶解度）不同而實(shí)現(xiàn)分離；當(dāng)流動(dòng)相流動(dòng)時(shí)，流動(dòng)相是溶解性相近的惰性氣體，而固定相的溶解性隨固定液的不同而不同，所以分配系數(shù)主要決定于固定液的性質(zhì)。

7.色譜法的分離原理是什么

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色譜法的基本原理：利用樣品混合物中各組分理利用樣品混合物中各組分理、化性質(zhì)的差異，各組分程度不同的分配到互不相溶的兩相中。當(dāng)兩相相對(duì)運(yùn)動(dòng)時(shí)，各組分在兩相中反復(fù)多次重新分配，結(jié)果使混合物得到分離。 兩相中，固定不動(dòng)的一相稱固定相；移動(dòng)的一相稱流動(dòng)相。 分類： 根據(jù)兩相的物態(tài)類型，有液-固色譜和液-液色譜兩類基本色譜方法。 液-固色譜的固定相是粉末狀或顆粒狀固體，具有表面吸附活性，流動(dòng)相是液體?；旌衔镏懈鹘M分在固定相表面上的吸附強(qiáng)度不同，當(dāng)流動(dòng)相流過(guò)時(shí)各組分隨流動(dòng)相的移動(dòng)速度不同而實(shí)現(xiàn)分離。柱色譜、薄層色譜大都屬于這類色譜。 液-液色譜的固定相是附著于載體的液層，流動(dòng)相是另一種液體。混合物中各組分在兩液相間的分配系數(shù)不同，則在兩液相中的濃度不同，隨流動(dòng)相移動(dòng)的速度也不同，從而實(shí)現(xiàn)分離。紙色譜和有些薄層色譜屬于這類色譜。 一、液-固色譜原理 液-固色譜是基于吸附和溶解性質(zhì)的分離技術(shù)，柱色譜屬于液-固吸附色譜。 當(dāng)混合物溶液加在固定相上，固體表面借各種分子間力（包括范德華力和氫鍵）作用于混合物中各組分，以不同的作用強(qiáng)度被吸附在固體表面。 柱色譜分離原理 放大瀏覽 由于吸附劑對(duì)各組分的吸附能力不同，當(dāng)流動(dòng)相流過(guò)固體表面時(shí)，混合物各組分在液-固兩相間分配。吸附牢固的組分在流動(dòng)相分配少，吸附弱的組分在流動(dòng)相分配多。流動(dòng)相流過(guò)時(shí)各組分會(huì)以不同的速率向下移動(dòng)，吸附弱的組分以較快的速率向下

8.色譜法分離是根據(jù)什么原理進(jìn)行的

色譜分離法；chromatographic separation在工業(yè)上應(yīng)用色譜分析原理分離性質(zhì)近似組分的方法。

使溶液分批通過(guò)垂直的填充吸附劑固定床，將各種組分分離精制。色譜柱內(nèi)的填充吸附劑是多孔的惰性固體，用非揮發(fā)性的惰性液體涂漬。

被分離溶液的溶質(zhì)與惰性液體有大小不同的溶解度。如果被吸附的物質(zhì)是氣體，發(fā)生“吸收”現(xiàn)象。

如果被吸附的物質(zhì)是液體，發(fā)生“萃取”現(xiàn)象。分離系數(shù)取數(shù)聚決于分配系數(shù)的大小。

常用的操作法有：（1）迎頭分離法，當(dāng)溶液連續(xù)通入吸附固定床時(shí)，溶液中諸組分因吸附能力大小不同，可順序地由固定床另一端排出；（2）沖洗分離法，在送入溶液的同時(shí)，通入不被吸附的載體，可順序地被吸附和解吸，然后以一定的間隔隔離開；（3）頂替分離法，在載氣中加入吸附能力最強(qiáng)的組分，使依次頂替被吸附的諸組分。色譜分離除已在分析技術(shù)中廣泛應(yīng)用外，也已在化工、冶金和環(huán)保等領(lǐng)域中加以利用。

色譜的分離原理都是利用待測(cè)物質(zhì)在流動(dòng)相和固定相兩相間的分配系數(shù)的不同而實(shí)現(xiàn)分離.對(duì)于氣液色譜來(lái)說(shuō)，分離原理是利用不同物質(zhì)在流動(dòng)相以及固定液中的分配系數(shù)（溶解度）不同而實(shí)現(xiàn)分離；當(dāng)流動(dòng)相流動(dòng)時(shí)，流動(dòng)相是溶解性相近的惰性氣體，而固定相的溶解性隨固定液的不同而不同，所以分配系數(shù)主要決定于固定液的性質(zhì)。